Différence clé - HPLC vs HPTLC
La principale différence entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon tandis que HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon.
La chromatographie est une méthode de séparation physique utilisée pour séparer et identifier les composants d'un mélange. HPLC et HPTLC sont des techniques chromatographiques. HPLC est une chromatographie liquide haute performance. HPTLC est une chromatographie sur couche mince haute performance.
CONTENU
1. Présentation et différence clé
2. Qu'est-ce que HPLC
3. Qu'est-ce que HPTLC
4. Comparaison côte à côte - HPLC vs HPTLC sous forme tabulaire
5. Résumé
Qu'est-ce que HPLC?
HPLC est une chromatographie liquide haute performance. Il s'agit d'une technique analytique utilisée pour séparer, identifier et quantifier les composants d'un mélange. Dans cette technique, l'échantillon est dissous dans un solvant approprié. Ensuite, le solvant avec l'échantillon est passé à travers une pompe avec une pression donnée. La pompe est remplie de matériau adsorbant solide. Ensuite, certains composants se lient fortement au matériau absorbant tandis que d'autres composants se lient de manière lâche. Cela fait que les composants ont des débits différents à travers la pompe. Par conséquent, les composants peuvent être séparés facilement.
Figure 01: Un système HPLC
Le matériau adsorbant qui remplit la pompe est appelé phase stationnaire. Le solvant avec l'échantillon dissous est appelé phase mobile. La pompe utilisée dans cette technique s'appelle la colonne. La colonne est remplie d'un matériau adsorbant, le plus souvent des particules de silice. La taille de ces particules peut aller de 2 à 50 µm. Le processus de séparation est affecté par la composition de la phase mobile et la température du système. Les interactions entre la phase stationnaire et le composant de l'échantillon peuvent être des interactions hydrophobes, des interactions dipôle-dipôle, des liaisons ioniques, etc.
La pression de fonctionnement de la HPLC est considérablement plus élevée que celle de la chromatographie liquide traditionnelle. Il se situe autour de 50-350 bar. La différence entre la chromatographie liquide et la HPLC est qu'en chromatographie liquide, l'échantillon tombe à travers la colonne par gravité alors qu'en HPLC, l'échantillon est pressurisé à travers la colonne. La taille de la colonne et les particules absorbantes sont également très petites par rapport à la chromatographie liquide traditionnelle. Cependant, la résolution donnée par la technique HPLC est supérieure.
Qu'est-ce que HPTLC?
HPTLC est une chromatographie sur couche mince haute performance. C'est la forme avancée et automatisée du TLC traditionnel. Cette technique fournit une résolution efficace sur une courte période. Dans cette méthode d'analyse, l'échantillon et une référence peuvent être analysés en même temps, ce qui permet de comparer l'échantillon avec la référence. Il donne une précision analytique améliorée par rapport aux autres techniques chromatographiques. Le temps d'analyse est moindre. La technique est une technique peu coûteuse.
Figure 02: Une analyse des colorants alimentaires en utilisant HPTLC
La méthode HPTLC est un processus simple et l'étape de préparation de l'échantillon est également éliminée (dans la CCM traditionnelle, l'étape de préparation de l'échantillon est incluse avant la séparation. Cette étape implique le nettoyage et l'enrichissement). Le solvant peut être utilisé directement sans aucun prétraitement bien que d'autres techniques chromatographiques nécessitent des prétraitements tels que le dégazage, la filtration, etc.
Le matériau adsorbant utilisé en HPTLC est de la silice avec de très petites tailles de particules. En CCM traditionnelle, la granulométrie de la silice est de 5 à 20 μm alors qu'en HPTLC, elle est de 4 à 8 μm. L'échantillon est appliqué sur la plaque HPTLC à l'aide d'un applicateur. Il donne une application uniforme et sûre. Ensuite, les plaques sont placées dans une chambre ayant la phase mobile. La chambre doit être saturée avec la vapeur de la phase mobile. Après le processus HPTLC, les taches qui se sont déplacées peuvent être détectées. Lors de la détection des taches sur la plaque, la technique HPTLC utilise une région UV appropriée ou une chambre à iode.
Quelle est la différence entre HPLC et HPTLC?
Diff article au milieu avant la table
HPLC vs HPTLC |
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| HPLC est une chromatographie liquide haute performance. | HPTLC est une chromatographie sur couche mince haute performance. |
| Technique | |
| En HPLC, la phase mobile avec le solvant est passée à travers une colonne remplie de la phase stationnaire. | En HPTLC, l'échantillon est déposé sur une plaque TLC et est placé à l'intérieur d'une chambre contenant la phase mobile; ensuite, l'échantillon est autorisé à migrer vers le haut de la plaque avec la phase mobile. |
| La mesure | |
| En HPLC, les différences entre les débits des composants à travers la colonne sont utilisées pour séparer les composants dans l'échantillon. | En HPTLC, les différences entre les distances parcourues par chaque composant de l'échantillon sont utilisées pour séparer les composants de l'échantillon. |
| Séparation quantitative | |
| HPLC permet la séparation quantitative des composants dans un échantillon. | HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon. |
Résumé - HPLC vs HPTLC
HPLC et HPTLC sont deux techniques chromatographiques. La principale différence entre HPLC et HPTLC est que HPLC permet une séparation quantitative des composants dans un échantillon tandis que HPTLC ne permet pas la séparation quantitative des composants dans un échantillon.
