Différence clé - Coloration de Gram vs Acid Fast
Les bactéries sont de très petits microorganismes. Ils sont transparents et leur détection est difficile dans des conditions de vie et non tachées. Ainsi, diverses méthodes de coloration sont développées pour faciliter la détection bactérienne. Il existe trois principaux types de techniques de coloration: la coloration simple, la coloration différentielle et la coloration structurelle. La coloration différentielle est une technique qui utilise plus d'un colorant pour différencier les bactéries. La coloration de Gram et la coloration acido-résistante sont plus communément appelées taches différentielles. La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle, qui sépare les bactéries en deux groupes appelés bactéries Gram-positives et bactéries Gram-négatives. La coloration acido-résistante est une coloration différentielle utilisée pour identifier les organismes acido-résistants tels que Mycobacterium à partir d'organismes non acido-résistants. C'est la principale différence entre la coloration de Gram et la coloration Acid Fast.
CONTENU
1. Présentation et différence clé
2. Qu'est-ce que la coloration de Gram
3. Qu'est-ce que l'Acid Fast
4. Similitudes entre la coloration de Gram et l'Acid Fast
5. Comparaison côte à côte - Coloration de Gram vs Acid Fast sous forme tabulaire
6. Résumé
Qu'est-ce que Gram Stain?
La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle importante utilisée pour l'identification bactérienne en microbiologie. Cette technique a été introduite par le bactériologiste danois Hans Christian Gram en 1884. La coloration de Gram classe les bactéries en deux grands groupes nommés Gram positif et Gram négatif, qui sont très importants dans la classification et l'identification des bactéries. Les microbiologistes effectuent une coloration de Gram comme première étape de la caractérisation bactérienne au cours de leurs études.
Les bactéries sont regroupées en fonction des différences de leur paroi cellulaire. Les bactéries à Gram positif sont composées d'une épaisse couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire tandis que les bactéries à Gram négatif sont composées d'une fine couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Le résultat de la coloration de Gram sera basé sur la différence d'épaisseur de la couche de peptidoglycane de la paroi cellulaire.
La coloration de Gram est effectuée en utilisant quatre réactifs différents à savoir; tache primaire, mordant, décolorant et contre-tache. Le cristal violet et la safranine sont respectivement utilisés comme colorants primaires et contre-colorants, tandis que des grammes d'iode et 95% d'alcool sont respectivement utilisés comme mordant et décolorant. Les étapes de base de la coloration des grammes sont les suivantes;
- Un frottis bactérien est préparé sur une lame de verre propre, fixée à chaud et refroidie.
- Le frottis est inondé de cristal violet pendant 1 à 2 minutes.
- Le frottis est rincé à l'eau courante lente pour éliminer les taches en excès.
- Grams iode est appliqué sur le frottis pendant 1 minute.
- Le frottis est rincé à l'eau courante lente
- Le frottis est lavé avec de l'alcool à 95% pendant 2 à 5 secondes et rincé à l'eau courante lente.
- Le frottis est contre-coloré avec de la safranine pendant 1 minute
- Le frottis est rincé avec de l'eau courante lente, séché et observé au microscope.
À la fin de la coloration de Gram, les bactéries Gram négatives seront observées en rose tandis que les bactéries Gram positives seront observées en couleur violette.
Figure 01: Bactéries Gram négatif et Gram positif
Le résultat de la coloration des grammes est décidé par l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Au cours de l'étape de décoloration, le colorant primaire et le mordant sont facilement éliminés des bactéries à Gram négatif et deviennent incolores car ils ont une fine couche de peptidoglycane. Le colorant primaire est conservé dans les bactéries à Gram positif car elles ont une couche épaisse de peptidoglycane. La contre-coloration ne sera pas efficace pour les bactéries à Gram positif en raison de la rétention de la coloration principale. Ainsi, les grammes de bactéries positives seront visibles dans la couleur de la coloration primaire, c'est-à-dire la couleur violette. La contre-tache tachera les bactéries à Gram négatif, et elles seront visibles dans la couleur de sélection, qui est la couleur de safranine. Par conséquent, il est facile de classer les bactéries en deux groupes par coloration de Gram et il est utile pour la différenciation et l'identification bactériennes.
Qu'est-ce que Acid Fast?
La résistance aux acides est une propriété physique de certaines bactéries, en particulier leur résistance à la décoloration par les acides lors des procédures de coloration. Une fois colorés, ces organismes résistent aux procédures de décoloration à base d'acide dilué et / ou d'éthanol courantes dans de nombreux protocoles de coloration. Ainsi, le nom «acid fast» est donné à ces organismes. Cette propriété est démontrée en raison de la présence d'un niveau élevé de matériau cireux (acides mycoliques) dans leurs parois cellulaires. Ce test est essentiel pour l'identification de Mycobacterium tuberculosis.
Figure 2: Mycobactéries acido-résistantes
Cette coloration acido-résistante a été développée par Paul Ehrlich en 1882. La technique acido-résistante d'Ehrlich a été modifiée par Ziehl-Neelsen et elle est maintenant utilisée plus fréquemment. La procédure de coloration rapide à l'acide implique trois réactifs différents. Carbol fuschin est utilisé comme colorant primaire. L'alcool acide est utilisé comme agent de décoloration. Le bleu de méthylène est utilisé comme contre-tache. La procédure de coloration est effectuée comme suit.
- Le colorant principal (carbol fuchsine) est appliqué sur l'échantillon fixé sur la lame (toutes les cellules seront colorées en rouge).
- La lame est chauffée à la vapeur pendant 5 minutes, ce qui entraîne correctement les taches dans les cellules.
- Ensuite, la solution décolorante est ajoutée (cela élimine le colorant rouge de toutes les cellules à l'exception des bactéries acido-résistantes).
- Le bleu de méthylène est ajouté comme contre-colorant (il colore toutes les cellules bactériennes décolorées).
- Les bactéries acido-résistantes restent rouges tandis que les bactéries non acides se colorent en bleu.
Quelles sont les similitudes entre Gram Stain et Acid Fast?
- La coloration de Gram et l'acide rapide sont deux techniques de coloration différentielles.
- Les deux techniques classent les bactéries en deux groupes.
- Les deux techniques utilisent deux colorants et un décolorant.
Quelle est la différence entre Gram Stain et Acid Fast?
Diff article au milieu avant la table
Coloration de Gram vs Acid Fast |
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| La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle, qui sépare les bactéries en deux groupes de bactéries Gram-positives et de bactéries Gram-négatives. | La coloration Acid Fast est une coloration différentielle utilisée pour identifier les organismes acido-résistants à partir d'organismes non acido-résistants. |
| Tache primaire | |
| Le cristal violet est la tache principale couramment utilisée dans la coloration de Gram. | La fuchsine de carbol est la principale coloration utilisée dans les acides rapides. |
| Agent décolorant | |
| 95% d'alcool est utilisé comme agent décolorant dans les taches de gramme. | L'alcool acide est utilisé comme agent décolorant dans l'acide fast. |
| Contre-tache | |
| La coloration de Gram utilise la safranine comme contre-coloration. | La coloration rapide à l'acide utilise du bleu de méthylène comme contre-coloration. |
| Observation | |
| Les bactéries Gram négatives sont observées dans la couleur de sélection et les bactéries Gram positives sont observées dans la couleur violette. | Les bactéries acido-résistantes sont observées en rouge et les bactéries non acido-résistantes sont observées en bleu. |
Résumé - Coloration de Gram vs Acid Fast
La visualisation des micro-organismes à l'état vivant est difficile. Par conséquent, les colorations biologiques et les procédures de coloration sont largement utilisées pour étudier leurs propriétés. La coloration différentielle est un type de technique de coloration utilisé pour différencier les bactéries. La coloration de Gram et la coloration acido-résistante sont deux techniques de coloration différentielles. La coloration de Gram différencie les bactéries à Gram négatif et les bactéries à Gram positif en fonction de l'épaisseur de leurs parois cellulaires. La coloration rapide à l'acide différencie les bactéries acido-résistantes des bactéries non acido-résistantes en fonction de la teneur en acide mycolique dans la paroi cellulaire. C'est la différence entre la coloration rapide à l'acide et la coloration de gramme.
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