Différence clé - coloration de Gram vs culture
La coloration de Gram est une technique de coloration qui est effectuée pour différencier les bactéries en deux groupes en fonction de l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. La culture est une méthode de croissance et de maintien de micro-organismes dans des conditions de laboratoire pour différentes analyses. La principale différence entre la coloration des grammes et la culture est leur fonction; gram souche une technique de coloration des bactéries où la culture est une méthode de croissance et de maintien des micro-organismes.
CONTENU
1. Présentation et différence clé
2. Qu'est-ce que la coloration de Gram
3. Qu'est-ce que la culture
4. Comparaison côte à côte - Coloration de Gram vs culture
5. Résumé
Qu'est-ce que Gram Stain?
La coloration de Gram est une technique de coloration différentielle importante utilisée pour l'identification bactérienne en microbiologie. Cette technique a été introduite par le bactériologiste danois Hans Christian Gram en 1884. La coloration de Gram classe les bactéries en deux groupes principaux: Gram positif et Gram négatif; ceux-ci sont très importants dans la classification et l'identification des bactéries. La coloration de Gram est effectuée comme une étape initiale pour la caractérisation bactérienne.
Les bactéries sont regroupées en fonction des différences de leur paroi cellulaire. Les bactéries à Gram positif contiennent une couche épaisse de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire tandis que les bactéries à Gram négatif contiennent une fine couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire, comme le montre la figure 01. Le résultat de la coloration de Gram sera basé sur la différence d'épaisseur de la couche de peptidoglycane du paroi cellulaire.
Figure 1: bactéries Gram positives et bactéries Gram négatives
La coloration de Gram est effectuée en utilisant quatre réactifs différents à savoir; tache primaire, mordant, décolorant et contre-tache. Le cristal violet et la safranine servent respectivement de colorants primaires et de contre-coloration, tandis que les grammes d'iode et 95% d'alcool servent respectivement de mordant et de décolorant.
Étapes de base de la coloration Grams
- Un frottis bactérien est préparé sur une lame de verre propre, fixée à chaud et refroidie.
- Le frottis est inondé de cristal violet pendant 1 à 2 minutes.
- Le frottis est rincé à l'eau courante lente pour éliminer les taches en excès.
- Grams iode est appliqué sur le frottis pendant 1 minute.
- Le frottis est rincé à l'eau courante lente
- Le frottis est lavé avec de l'alcool à 95% pendant 2 à 5 secondes et rincé à l'eau courante lente.
- Le frottis est contre-coloré avec de la safranine pendant 1 minute
- Le frottis est rincé avec de l'eau courante lente, séché et observé au microscope.
À la fin de la coloration de Gram, les bactéries Gram négatives seront observées en rose tandis que les bactéries Gram positives seront observées en couleur violette comme le montre la figure 02. Le résultat de la coloration en grammes est décidé par l'épaisseur de la couche de peptidoglycane dans leur paroi cellulaire. Au cours de l'étape de décoloration, le colorant primaire et le mordant sont facilement éliminés des bactéries à Gram négatif et deviennent incolores car ils ont une fine couche de peptidoglycane. Le colorant primaire est conservé dans les bactéries Gram positives car elles ont une couche épaisse de peptidoglycane. La contre-coloration ne sera pas efficace pour les bactéries Gram positives en raison de la rétention de la coloration principale. Ainsi, les grammes de bactéries positives seront visibles dans la couleur primaire de la coloration, c'est-à-dire la couleur violette. La contre-coloration tachera les bactéries à Gram négatif et sera visible dans la couleur de sélection qui est la couleur de safranine. Par conséquent, il est facile de classer les bactéries en deux groupes par la coloration de Gram et il est utile pour la différenciation et l'identification bactériennes.
Figure 2: souche de Gram
Qu'est-ce que la culture?
La culture microbienne est une méthode de culture et de maintien des micro-organismes dans des conditions de laboratoire à des fins différentes. Les cultures sont cultivées dans des milieux solides, semi-solides et liquides en fonction du type et du but de la culture du micro-organisme. Les cultures reçoivent les nutriments nécessaires et les conditions de croissance requises par les micro-organismes. Il existe différents composants d'un milieu de culture tels que la source d'énergie, la source de carbone, la source d'azote, les minéraux, les micronutriments, l'eau, l'agent de solidification, etc. La température optimale, l'oxygène et le pH doivent être ajustés en fonction du type de micro-organisme cultivé.
Il existe différents types de cultures microbiennes; par exemple, culture discontinue, culture continue, culture au couteau, culture sur plaque d'agar, culture en bouillon, etc. Selon la composition du milieu de culture, il existe différents types de milieux de culture appelés milieux synthétiques, milieux semi-synthétiques et milieux naturels. Les cultures microbiennes sont préparées dans des conditions stériles à l'intérieur d'une chambre spéciale appelée flux d'air laminaire. Le milieu de culture et la verrerie sont stérilisés avant l'inoculation du micro-organisme souhaité. Dans des conditions stériles appropriées, le microorganisme cible est transféré dans le milieu nutritif stérilisé et incubé à une température optimale. À l'intérieur du milieu, les micro-organismes se développeront et se multiplieront en utilisant les nutriments fournis.
Figure 3: Une culture bactérienne sur plaque
Quelle est la différence entre Gram Stain et Culture?
Diff article au milieu avant la table
Coloration de Gram vs Culture |
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| La souche Grams est une technique de coloration différentielle utilisée pour la différenciation et l'identification bactériennes. | La culture microbienne est une méthode de culture de micro-organismes en laboratoire. |
| Composants | |
| Cela utilise différents réactifs dont deux colorants. | Cela utilise différents milieux de culture tels que des milieux solides, semi-solides et liquides composés de nutriments et d'autres conditions nécessaires. |
| Les fonctions de base | |
| Cela permet de regrouper les bactéries en deux groupes: les grammes négatifs et les grammes positifs. | Cela permet la multiplication des micro-organismes à des fins différentes. |
| Base | |
| Le résultat de la coloration de Gram est basé sur les différences dans la couche de peptidoglycane de la paroi cellulaire. | Les micro-organismes se développeront et se multiplieront à l'intérieur des milieux de culture. |
| Résultat | |
| Les bactéries Gram négatif sont visibles en rose et les bactéries Gram positives sont visibles en couleur violette. | Sur les plaques, des colonies de micro-organismes peuvent être vues. Sur les milieux liquides, les microorganismes sont sous forme de suspension. |
Résumé - Coloration de Gram vs Culture
Les cultures microbiennes sont préparées et maintenues dans des conditions de laboratoire à des fins différentes telles que le stockage, les tests, la purification chimique, etc. La coloration de Gram est une procédure de coloration qui différencie les bactéries en deux groupes principaux appelés bactéries Gram négatif et bactéries Gram positives. Par conséquent, la différence entre la coloration en grammes et la culture est que la coloration en grammes est une technique de coloration des bactéries tandis que la culture est une méthode de croissance et de maintien des micro-organismes dans les laboratoires.
