Différence clé - Phusion vs Taq Polymerase
Les ADN polymérases sont des enzymes largement utilisées dans les techniques de biologie moléculaire et sont également naturellement présentes dans tous les organismes qui subissent une réplication de l'ADN. Ce sont les principales enzymes de polymérisation impliquées lors de la réplication. L'ADN polymérase est capable d'ajouter des nucléotides à l'extrémité 3 'libre du brin d'ADN provoquant ainsi l'extension d'un nouveau brin. À l'heure actuelle, en raison des développements de la biologie moléculaire dans le diagnostic des maladies et les applications industrielles, il est important de fabriquer des polymérases ayant diverses propriétés bénéfiques. Cela augmente la précision de la méthode et en fait une technique plus rapide. La Phusion et la Taq polymérase sont deux enzymes polymérases thermostables produites dans le commerce qui sont utilisées dans des applications moléculaires spéciales. Phusion est une ADN polymérase isolée de Pyrococcus furiosus et est principalement utilisée dans les expériences de clonage pour augmenter la fidélité. La Taq ADN polymérase est l'ADN polymérase standard utilisée dans la réaction en chaîne par polymérase (PCR), et elle est isolée de la bactérie thermostable; Thermus aquaticus. La principale différence entre les deux enzymes est le micro-organisme source. La phusion est isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus, tandis que la Taq polymérase est isolée du thermophile, Thermus aquaticus. La Taq polymérase est isolée du thermophile Thermus aquaticus. La Taq polymérase est isolée du thermophile Thermus aquaticus.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que Phusion
3. Qu'est-ce que la Taq Polymerase
4. Similitudes entre Phusion et Taq Polymerase
5. Comparaison côte à côte - Phusion vs Taq Polymerase sous forme tabulaire
6. Résumé
Qu'est-ce que Phusion?
L'ADN polymérase de Phusion est une nouvelle polymérase fabriquée en isolant l'enzyme de Pyrococcus furiosus, qui est une archée extrémophile. Ces microbes résident dans des conditions de températures extrêmement élevées, faisant ainsi de la polymérase une polymérase hautement thermostable. La phusion polymérase est utilisée pour obtenir une fidélité extrême par rapport à la polymérase thermostable conventionnelle; Taq polymérase. La polymérase de phusion est capable d'amplifier de longues matrices jusqu'à 7,5 kb d'ADN génomique. La capacité de polymérisation optimale de la Phusion polymérase est à 72 0 C. La Phusion est également utilisée dans les produits de clonage pour le séquençage, l'analyse d'expression et l'analyse de mutation.
L'ADN polymérase de Phusion a une activité d'exonucléase 3 '- 5'. Cela permet la relecture du brin nouvellement synthétisé après la synthèse. Par conséquent, les mésappariements de nucléotides sont facilement réparés. Ainsi, il a un taux d'erreur moindre. Les avantages globaux de la Phusion polymérase sont;
- Fidélité extrême
- Vitesse élevée et temps d'extension réduit
- Réactions robustes et nécessite une optimisation minimale
- Haut rendement
Figure 01: Phusion
Le principal inconvénient de la Phusion polymérase est qu'elle est inhibée en présence de désoxyuridine triphosphate (dUTP). Lorsque les dUTP sont accumulés dans le mélange réactionnel, cela peut inhiber les actions de la Phusion polymérase. Ceci est évité en traitant le mélange réactionnel avec la dUTPase avant d'ajouter l'enzyme. À l'heure actuelle, une variante résistante au dUTP de la Phusion polymérase connue sous le nom de Pfu Turbo est utilisée à la place de la Phusion polymérase pour remédier à ce problème.
Qu'est-ce que la Taq Polymerase?
L'invention de l'ADN polymérase Taq a révolutionné le domaine de la biologie moléculaire. Il a résolu un problème majeur d'amplification de l'ADN. L'ADN polymérase Taq est une enzyme polymérase thermostable extraite et isolée de la bactérie thermophile, Thermus aquaticus. La découverte de ces enzymes conduit au développement de la PCR. Cette enzyme a permis l'utilisation de la réaction en chaîne par polymérase dans l'amplification de l'ADN au lieu des techniques de clonage laborieuses conventionnelles. La PCR est maintenant utilisée dans le diagnostic moléculaire, les domaines agricoles et industriels avec de nombreuses nouvelles variantes ajoutées à la technique.
Figure 02: Polymérase Taq
L'ADN polymérase Taq fonctionne à la température optimale comprise entre 72 0 C et 80 0 C. L'ADN polymérase Taq nécessite un cofacteur; magnésium pour sa fonction. La Taq polymérase n'a pas la capacité de relecture 3 '- 5', par conséquent, le taux d'erreur de la Taq ADN polymérase est élevé par rapport aux types plus récents d'ADN polymérases telles que la Phusion polymérase, etc. Mais, la popularité de l'ADN polymérase Taq reste la même dans le monde de la science en raison de la commodité et de la flexibilité de l'enzyme.
Quelles sont les similitudes entre la Phusion et la Taq polymérase?
- Les enzymes polymérases Phusion et Taq sont des enzymes de polymérisation capables d'ajouter des nucléotides à l'extrémité libre 3 'du brin d'ADN.
- Les polymérases Phusion et Taq nécessitent toutes deux une séquence d'amorces pour initier la polymérisation.
- Les polymérases Phusion et Taq sont stables à la chaleur.
- Les polymérases Phusion et Taq sont utilisées dans les mécanismes de PCR pour amplifier l'ADN.
- Lors de l'ajout de la polymérase au mélange réactionnel, les polymérases Phusion et Taq sont ajoutées en dernier pour garantir l'efficacité de l'enzyme.
- Les polymérases Phusion et Taq sont synthétisées dans le commerce à des fins expérimentales de biologie moléculaire.
- Les polymérases Phusion et Taq nécessitent un cofacteur pour remplir sa fonction.
Quelle est la différence entre Phusion et Taq Polymerase?
Diff article au milieu avant la table
Phusion vs Taq Polymérase |
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| Phusion est une ADN polymérase isolée de Pyrococcus furiosus et est principalement utilisée dans les expériences de clonage pour augmenter la fidélité. | L'ADN polymérase Taq est l'ADN polymérase standard utilisée dans la réaction en chaîne par polymérase (PCR), et elle est isolée de la bactérie thermostable, Thermus aquaticus. |
| Organisme source | |
| La phusion est extraite des archées extrémophiles - Pyrococcus furiosus. | Ces œuvres littéraires s'étendent de la période de colonisation à la période de décolonisation. |
| Capacité de relecture | |
| La capacité de lecture d'épreuves de 3 '- 5' est présente dans Phusion. | La capacité de lecture d'épreuves 3 '- 5' est absente dans la Taq polymérase. |
| fidélité | |
| La haute fidélité est là avec Phusion. | La Taq polymérase montre une faible fidélité. |
| Amplification | |
| Phusion est capable d'amplifier de longs fragments d'ADN. | La Taq polymérase est capable d'amplifier des fragments d'ADN beaucoup plus courts. |
| Empoisonnement dUTP | |
| L'action de la phusion est inhibée par l'accumulation impaire. | La Taq polymérase n'est pas inhibée par le dUPT. |
Résumé - Phusion vs Taq polymérase
L'ADN polymérase Phusion et Taq sont deux polymérases thermostables utilisées dans les techniques de PCR. La phusion est une polymérase isolée de l'extrémophile, Pyrococcus furiosus, tandis que Taq est isolée de la bactérie thermostable Thermus aquaticus. La découverte de l'ADN polymérase Taq conduit à l'invention de la PCR. Phusion présente de nombreux avantages par rapport à Taq qui ont fait de Phusion une meilleure option pour produire de l'ADN haute fidélité. Cependant, la Taq polymérase est toujours utilisée comme enzyme polymérase standard dans la PCR. C'est la différence entre la Phusion et la Taq polymérase.
