Différence clé - HPLC vs LCMS
Examinons d'abord la signification de HPLC et LCMS avant d'analyser la différence entre HPLC et LCMS. La chromatographie est une technique de séparation en analyse chimique où les constituants de l'échantillon sont séparés lors du passage à travers un milieu chromatographique. Cela implique également une interaction avec l'échantillon, la phase stationnaire et la phase mobile. HPLC signifie High Performance Liquid Chromatography, et il est utilisé comme méthode de chromatographie liquide en chimie analytique. La combinaison de la chromatographie liquide et de la spectroscopie de masse (LCMS) a été développée pour l'analyse quantitative de biomolécules sélectionnées et c'est une procédure de test très sensible, précise et spécifique par rapport à la HPLC. C'est la principale différence entre HPLC et LCMC. Cet article vous présentera HPLC et LCMC qui traitent de l'analyse chimique et discutera des différences entre HPLC et LCMS.
Qu'est-ce que HPLC?
La chromatographie liquide à haute performance (HPLC) est une technique de séparation populaire en chimie analytique. Il est principalement utilisé pour séparer les composants, pour identifier et quantifier chaque composant dans un mélange. Auparavant, ce procédé était connu sous le nom de chromatographie liquide haute pression car il dépendait de pompes pour faire circuler un solvant liquide sous pression comprenant le mélange d'échantillon à travers une colonne garnie d'un matériau adsorbant solide. Chaque constituant du mélange d'échantillon interagit différemment avec le matériau adsorbant solide, ce qui entraîne des débits différents pour différents constituants. Cela peut conduire à la séparation des constituants lorsqu'ils s'écoulent de la colonne HPLC.
La CLHP a été utilisée pour diverses applications telles que l'analyse des taux de vitamine D dans le sang, l'utilisation de drogues illégales par les athlètes en détectant les résidus de médicaments dans leur urine, le tri des constituants d'un échantillon biologique complexe à des fins de recherche et l'analyse et la fabrication de produits pharmaceutiques.
Qu'est-ce que LCMS?
La chromatographie liquide-spectrométrie de masse (LCMS) est une technique analytique qui combine les capacités de séparation physique de la chromatographie liquide avec les capacités d'analyse de masse de la spectrométrie de masse (MS). La chromatographie liquide est une technique de séparation et la spectrométrie de masse est utilisée pour analyser le rapport masse / charge des particules chargées. La séparation physique est généralement réalisée par HPLC et, en variante, LCMS également connu sous le nom de HPLC-MS. Le LCMS est une technique analytique dominante qui a une précision, une sensibilité et une spécificité très élevées par rapport à la HPLC. Ainsi, il est utile dans de nombreuses applications telles que la recherche, l'analyse de médicaments, l'analyse des aliments, etc. LCMS est principalement utilisé pour séparer, détecter, identifier et quantifier les propriétés biochimiques d'un échantillon particulier en présence de mélanges chimiques complexes.
Quelle est la différence entre HPLC et LCMC?
Acronyme et définition de HPLC et LCMC
HPLC: HPLC est l'abréviation de High-Performance Liquid Chromatography. Il s'agit d'une technique de séparation principalement utilisée pour séparer les composants, identifier et quantifier chaque composant d'un mélange.
LCMS: LCMS signifie chromatographie liquide et spectrométrie de masse. Il s'agit d'une technique analytique qui combine les capacités de séparation physique de la chromatographie liquide avec les capacités d'analyse de masse de la spectrométrie de masse (MS).
Caractéristiques de HPLC et LCMC
Classification
HPLC: Ceci est une méthode de chromatographie liquide uniquement.
LCMS: Il s'agit d'une combinaison de méthode de chromatographie liquide et de méthode de spectrométrie de masse.
Efficacité
HPLC: Par rapport au LCMS, l'analyse HPLC est moins efficace et plus lente.
LCMS: Par rapport à HPLC, l'analyse LCMS est efficace et plus rapide.
Sensibilité
HPLC: Par rapport au LCMS, l'analyse HPLC est moins sensible.
LCMS: Par rapport à HPLC, l'analyse LCMS est plus sensible.
Spécificité
HPLC: Par rapport au LCMS, l'analyse HPLC est moins spécifique.
LCMS: Par rapport à HPLC, l'analyse LCMS est plus spécifique.
Précision
HPLC: HPLC donne des résultats moins précis que LCMS pour la détermination de certains produits chimiques.
LCMS: LCMS donne des résultats plus précis que HPLC pour la détermination de certains produits chimiques.
Composant
HPLC: HPLC peut être considérée comme un composant du LCMS.
LCMS: LCMS ne peut pas être considéré comme un composant de HPLC.
Source d'ions
HPLC: la source d'ions n'existe pas dans l'instrument HPLC.
LCMS: la source d'ions est présente dans l'instrument LCMS.
Applications
HPLC: les ions, les polymères, les molécules organiques et les biomolécules peuvent être analysés en utilisant HPLC.
LCMS: Les molécules organiques et les biomolécules peuvent être analysées. Contrairement à HPLC, LCMS peut être utilisé pour examiner des mélanges incomplètement résolus.
Opération
HPLC: Le schéma d'un instrument HPLC est donné dans la figure 1, et il comprend généralement un échantillonneur automatique, des pompes et un détecteur. L'échantillonneur introduit le mélange d'échantillon dans la phase mobile (mélange pressurisé de solvants tels que l'eau, l'acétonitrile et / ou le méthanol) qui le transfère dans la colonne. Les pompes délivrent le débit et la composition souhaités de la phase mobile à travers la colonne. La colonne est remplie d'adsorbant, qui est une particule solide granuleuse telle que de la silice ou des polymères. Le détecteur produit un signal proportionné à la quantité de présence de constituant d'échantillon dans la colonne, permettant ainsi une analyse quantifiable des constituants d'échantillon sélectionnés. L'instrument HPLC est contrôlé et l'analyse des données est fournie par un microprocesseur numérique et un logiciel utilisateur.
Figure 1: Schéma de l'instrument HPLC
LCMS: Le diagramme de l'instrument LCMS est donné sur la figure 2. L'extrait d'échantillon est inséré dans la colonne constituée de HPLC. Cette colonne contient des échantillons de métabolites basés sur des caractères physiques, et différents métabolites s'écoulent vers le spectromètre de masse à différents intervalles de temps. La spectroscopie de masse est utilisée pour évaluer les masses de particules, pour déterminer la disposition élémentaire d'une molécule et pour clarifier les structures des molécules. Cependant, l'échantillon doit être ionisé pour générer des molécules chargées afin de déterminer leurs rapports masse-charge. Par conséquent, au lieu d'instruments HPLC, le LCMS se compose de trois modules supplémentaires tels qu'une source de fer, un analyseur de masse et un détecteur. Une source d'ions peut transformer un échantillon de phase gazeuse en ions et un analyseur de masse regroupant les ions par leurs masses à l'aide de champs électromagnétiques. Finalement,un détecteur quantifie les valeurs et délivre des données de chaque ion présent dans l'échantillon. La technique LCMS peut être utilisée pour des applications qualitatives et quantitatives.
Figure 2: Schéma de l'instrument LCMS
En conclusion, HPLC est une méthode de chromatographie liquide alors que LCMS est une combinaison de chromatographie liquide et de spectrométrie de masse. Ces deux techniques d'analyse ont des caractéristiques différentes, mais elles peuvent être utilisées pour identifier et quantifier des compositions alimentaires, des produits pharmaceutiques et d'autres molécules bioactives.
