Différence clé - Vecteur de phage YAC vs M13
Le clonage d'ADN est un processus important qui permet la propagation d'importants fragments d'ADN d'organismes. Cela nécessite la jonction d'ADN spécifique avec l'ADN vecteur pour créer un ADN recombinant qui se transforme en l'organisme hôte. Un vecteur est une molécule d'ADN qui se comporte comme un véhicule pour transporter du matériel génétique étranger dans une autre cellule ou un autre organisme. Il doit être capable de se répliquer à l'intérieur de l'organisme hôte et de produire plusieurs copies d'ADN recombinant. Il existe différents types de vecteurs utilisés dans le clonage d'ADN. Le chromosome artificiel de levure (YAC) et le vecteur phage M13 sont deux types parmi eux. La principale différence entre le vecteur phage YAC et M13 est que YAC est un chromosome artificiel qui se réplique dans les cellules de levure tandis que le vecteur phage M13 est un ADN circulaire simple brin du bactériophage M13 qui se réplique dans les cellules E. Coli.
CONTENU
1. Aperçu et différence clé
2. Qu'est-ce que YAC
3. Qu'est-ce que le vecteur phage M13
4. Comparaison côte à côte - Vecteur phage YAC vs M13
5. Résumé
Qu'est-ce qu'un vecteur YAC?
YAC est un chromosome artificiellement construit qui a la capacité de transporter un grand segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. Il possède des séquences centromères, télomères et à réplication autonome essentielles à la réplication et à la stabilité. Le YAC doit également porter un marqueur sélectif ou des marqueurs et des sites de restriction pour en faire un vecteur de clonage efficace. De grandes séquences allant de 1000 kb à 2000 kb peuvent être insérées dans YAC et transférées dans la levure.
Figure 01: Vecteur YAC
Qu'est-ce que le vecteur phage M13?
Le bactériophage M13 est un virus qui infecte et se réplique dans E. Coli. Le génome du bactériophage M13 est de petite taille, environ 6,7 kb. C'est un ADN simple brin, circulaire et sens positif. Ce virus infecte spécifiquement les bactéries E Coli par le biais de F pilus. Une fois qu'il entre dans l'ADN ss dans la bactérie, il synthétise son brin complémentaire et devient ADNdb ou la forme réplicative (RF) de M13. RF peut se comporter comme un plasmide dans l'organisme hôte. L'ADNdb se réplique dans E Coli et produit un ADNsb portant de nouveaux phages. Ces nouveaux phages sont continuellement libérés du E Coli sans tuer la cellule hôte. Cependant, l'infection ralentit la croissance d'E Coli. L'ADNdb peut être extrait de cellules bactériennes et utilisé comme vecteur dans le clonage d'ADN. Ils sont connus sous le nom de vecteurs phages M13. Ils peuvent être facilement manipulés et utilisés de la même manière que les vecteurs plasmidiques.
La capacité inhérente d'infection de ces phages M13 sert de bonne qualification pour être utilisé comme vecteur dans le clonage de gène. Lors du développement de M13 en vecteur, plusieurs éléments doivent être incorporés dans son génome. Il s'agit d'un gène de la protéine lac répresseur (lac I), de la région opérateur-proximale du gène lac Z, d'un promoteur lac et d'un site de clonage multiple (polylinker). Lorsque l'ADNdb du M13 est utilisé comme vecteur, il peut être traité comme un vecteur plasmidique. Cependant, l'utilisation de l'ADNsb M13 présente des avantages dans le séquençage de l'ADN et la mutagenèse dirigée.
Étant donné que le vecteur phage M13 porte plusieurs sites de clonage dans la région lacZ, les vecteurs recombinés peuvent être facilement identifiés par le criblage de colonies bleu / blanc sur des plaques d'agar contenant IPTG et X-Gal. Les plaques bleues produites sur les plaques ne contiennent pas les phages recombinés. Par conséquent, les phages avec inserts peuvent être sélectionnés à des fins de clonage.
Figure 02: Bactériophage M13
Quelle est la différence entre YAC et M13 Phage Vector?
Diff article au milieu avant la table
Vecteur de phage YAC vs M13 |
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| YAC est un chromosome génétiquement modifié qui a la capacité de transporter un large segment d'ADN étranger et de se répliquer dans les cellules de levure. | Le vecteur phage M13 est un vecteur viral développé par le bactériophage M13 qui est utilisé pour insérer un ADN étranger dans E. Coli. |
| Objectif | |
| Les YAC ont été conçus pour cloner de grands fragments d'ADN génomique dans la levure. | Les vecteurs phages M13 sont utilisés pour insérer de l'ADN étranger dans E. Coli. |
| Longueur d'insertion | |
| Les YAC peuvent contenir des insertions génomiques de la taille d'une mégabase (1000 kb - 2000 kb). | La taille des inserts est d'environ 1 500 bps. |
| Construction | |
| L'ADN YAC est difficile à purifier intact et nécessite une concentration élevée pour générer un système de vecteur YAC. | Il se produit via une chaîne d'électrons photosynthétique cyclique. |
| Stabilité | |
| YAC est instable. | Les phages M13 peuvent être facilement extraits. |
| Taille | |
| Les enzymes sont des molécules plus grosses. | Les phages M13 sont stables que YAC. |
Résumé - Vecteur de phage YAC vs M13
YAC est un système de vecteur artificiellement construit utilisant une région spécifique du chromosome de levure pour insérer de grands segments de matériel génétique dans des cellules de levure. Le vecteur phage M13 est un système de vecteur dérivé du bactériophage M13 qui utilise E. coli comme organisme hôte. C'est la principale différence entre YAC et M13 Phage Vector. Les deux sont également utiles dans la technologie de l'ADN recombinant et le clonage de gènes.
